數(shù)字PCR定量檢測HBVcccDNA

背景與目的：隱匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的準(zhǔn)確診斷需要HBsAg陰性者肝活檢組織中HBVDNA的證實。然而，在臨床實踐中，潛伏的OBI是通過發(fā)現(xiàn)抗Hb核心抗原的抗體(抗HBc)而推斷出來的。我們調(diào)查了抗HBc陽性受試者中OBI的真實患病率和肝內(nèi)HBV的分子特征。

方法：對100例標(biāo)準(zhǔn)血清學(xué)抗-HBc陽性的移植供者(平均年齡68.2歲；男64例，女36例)，用巢式PCR檢測總HBVDNA，用數(shù)字PCR檢測HBVcccDNA(線性：R²=0.9998；定量和檢測下限分別為2.4和0.8拷貝/10⁵細(xì)胞)。

結(jié)果：52%(52/100)的受試者存在真實的OBI狀態(tài)，52%(27/52)的OBI陽性者存在cccDNA，中位數(shù)為13拷貝/10⁵細(xì)胞(95%可信區(qū)間5-25)。采用IgG型抗HBc特異性檢測，HBVcccDNA陽性獻(xiàn)血者的中位抗體水平顯著高于陰性獻(xiàn)血者

(5.7 [3.6-9.7] vs. 17.0 [7.0-39.2] COI, p=0.007)。經(jīng)多因素分析，抗-HBc IgG值>4.4cccDNA與肝內(nèi)HBVcccDNA的發(fā)現(xiàn)相關(guān)(OR=8.516，p=0.009)，低于該值則排除其存在，陰性預(yù)測值為94.6%。

結(jié)論：采用一種新的基于ddPCR的內(nèi)部檢測方法，在大約一半的OBI病例中，肝內(nèi)HBV cccDNA可被定量檢測到。抗HBc IgG滴度可能是預(yù)測免疫抑制患者OBI再激活風(fēng)險的有用指標(biāo)。